HEK293T细胞中NLRP3炎性小体活化体系的构建

摘要：

NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体是一种蛋白复合体,在机体抵抗感染以及无菌性炎症中发挥了至关重要的作用.在HEK293T细胞中构建NLRP3炎性小体活化体系有助于研究其活化及调节机制.将质粒NLRP3、凋亡相关点样蛋白(ASC)、胱冬肽酶-1(Caspase-1)以及pro-1β转染至HEK293T细胞中,随后加入尼日利亚菌素(Nigericin),并利用Western blot以及酶联免疫吸附试验(ELISA)测定成熟的IL-1β.试验结果表明:转染了完整NLRP3炎性小体组分的细胞蛋白和上清中均可检测到IL-1β的成熟体,反之,未转染完整组分的细胞蛋白及上清中不能检测到IL-1β成熟体;同时,随着NLRP3转染量的增加,可检测到的IL-1β的成熟体增加.本研究在HEK293T细胞中成功构建了NLRP3炎性小体活化体系,为后续研究奠定了基础.

关键词：NLRP3炎性小体、HEK293T细胞、质粒转染、IL-1β成熟体、抗感染

所属期刊栏目：31

分类号：R392

资助基金：国家重点研发计划;湖南省优秀青年基金项目

在线出版日期：2022-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：331-336