斑马鱼基因ATF4多克隆抗体的制备

摘要：

ATF4是含有bZIP结构域的ATF/CREB转录因子家族成员,对胚胎的发育以及细胞的增殖、分化有重要的调节作用.制备ATF4的多克隆抗体对于研究其在斑马鱼心脏发育过程中的作用有重要的意义.研究首先通过生物信息学方法,选择ATF4基因中特异性强、具亲水性的一段核苷酸序列(1 017 bp),通过PCR扩增,将片段重组到原核表达载体pET-28a,然后转化人Rosetta菌株中.经测序鉴定正确后,用IPTG诱导表达融合蛋白,以该融合蛋白免疫小鼠,获得ATF4多克隆抗鼠血清.对该多抗血清抗体进行验证,具有很好特异性和较高效价,可以用作Western-blotting、免疫印迹等试验分析.

关键词：ATF4、融合蛋白、多克隆抗体

所属期刊栏目：21

分类号：Q71(生物大分子的结构和功能)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30930054

在线出版日期：2012-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：56-59