猪肺炎支原体P97基因随机肽库的构建

摘要：

目的:构建能用于抗原表位筛选的猪肺炎支原体(Mhp)P97基因C-端序列噬菌体随机肽库.方法: 以Mhp Z株(强毒)基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得Mhp P97基因的C-端部分序列,扩增产物用DNaseⅠ消化并回收50 bp～100 bp的随机片段,将回收的随机片段插入pC89pⅧ型噬菌粒载体中,转化大肠杆菌XL1-Blue,辅助噬菌体VCSM13超感染,使P97基因随机片段以融合蛋白的形式展示于噬菌体表面, 从而成功构建了P97基因特异性噬菌体随机肽库.用PCR及DNA测序法鉴定所建文库的随机性和多样性,测定肽库的滴度并计算库容量.结果: 所建肽库的容量约为1.8×104,滴度约为1.3×1012 TU/mL,PCR检测及DNA测序结果显示插入片段具有随机性和多样性.结论: 所建随机肽库具有较好的随机性和多样性,能够满足后续的抗原表位筛选,为进一步的深入研究奠定了基础.

关键词：猪肺炎支原体、P97基因、随机肽库、随机片段

所属期刊栏目：17

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：山西省科技厅攻关项目051056

在线出版日期：2008-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：608-612