猪乳中一高分子量蛋白质的分离纯化和鉴定

摘要：

对猪乳中一高分子量蛋白(HMWP)进行了分离纯化,并对其某些生化性质进行了鉴定.猪乳通过去脂得到脱脂乳,再去除酪蛋白得到乳清.对乳清进行硫酸铵分级盐析,猪乳中HMWP在40%饱和度硫酸铵盐析下有最大沉淀.收集40 %饱和度硫酸铵盐析沉淀,经过溶解、透析得到HMWP的粗品.通过Mono Q离子交换柱,对其粗品进行两次层析提纯,得到了HMWP纯品,其纯度和得率分别为97.85 %和12.31 %.多种植物凝集素的Western blotting鉴定表明,HMWP是一个糖基种类较少的糖蛋白,含有Man和GlcNAc.SDS-PAGE和凝胶过滤分别测得HMWP的分子量为114.8 kD和115.0 kD.通过等电点测定,HMWP的pI为5.10.HMWP的氨基酸组分分析得知,其富含Asp、Glu、Gly和Cys,疏水性氨基酸较低,仅占15.59 %摩尔分数.这些结果说明HMWP是一个易溶于水的、酸性的分泌性单体球蛋白.N端氨基酸序列测定结果为Ala-Leu-Val-Gln-Ser-Gly-Leu-Asn-Leu-Val,通过从网络Genbank 检索没有发现其同源蛋白的序列,说明其可能是一个新蛋白.

关键词：猪乳、高分子量蛋白质、纯化、鉴定

所属期刊栏目：13

分类号：Q51;S282(蛋白质)

资助基金：国家自然科学基金39770554

在线出版日期：2004-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：67-73