锌指蛋白Zpr1对3T3-L1前脂肪细胞分化及胰岛素信号通路的影响及其机制

摘要：

目的 探讨锌指蛋白ZPR1对前脂肪细胞分化及胰岛素信号通路的影响及潜在的分子机制.方法 采用高脂饲料喂养8周龄C57BL/6J雄性小鼠16周建立高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠模型(IR模型组,n=7),以常规饲料喂养小鼠为对照组(n=7).采用葡萄糖耐量及胰岛素耐量实验,检测各组小鼠血糖值,验证诱导组小鼠胰岛素抵抗表型.采用Western blotting及RT-PCR检测模型组及对照组小鼠皮下和内脏脂肪组织中Zpr1蛋白及mRNA表达的变化.采用生物信息学预测联合双荧光素酶报告基因系统检测人ZPR1的单核苷酸多态性(SNP)rs964184位点分别出现GG基因型和CC基因型时对miR-4286结合ZPR13'UTR的影响.小鼠前脂肪细胞3T3-L1转染miR-4286模拟物后,观察miR-4286调控Zpr1表达对脂肪细胞分化及胰岛素信号通路的影响.结果 与对照组比较,IR模型组小鼠皮下及内脏脂肪组织中Zpr1蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05),且内脏脂肪组织降低更明显(P<0.01).ZPR1的rs964184 SNP位点导致ZPR13'UTR不易形成多重发卡结构,可促进miR-4286识别并结合于ZPR13'UTR.IR模型组小鼠皮下及内脏脂肪组织中miR-4286表达水平明显升高,且内脏脂肪组织中增高更明显(P<0.05).小鼠前脂肪细胞3T3-L1中Zpr1蛋白的表达水平受miR-4286模拟物调控降低(P<0.05);而转染miR-4286模拟物后,3T3-L1细胞中脂肪细胞分化及胰岛素信号通路相关蛋白PPAR-γ、Perilipin A、pAkt、IRS-1表达水平明显降低(P<0.05).结论 GG型rs964184位点可促进miR-4286对Zpr1的转录后调控,Zpr1低表达可抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化及胰岛素信号通路.

关键词：锌指蛋白Zpr1、高脂饮食、胰岛素抵抗、脂肪细胞、细胞分化、胰岛素信号通路

所属期刊栏目：48

分类号：R589.2(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：国家自然科学基金;陕西省卫生健康科研基金项目

在线出版日期：2023-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：394-402