10.11855/j.issn.0577-7402.2023.01.0042
miR-491-5p对缺氧诱导的滋养细胞凋亡的促进作用及其机制
目的 探讨microRNA-491-5p(miR-491-5p)在缺氧诱导的滋养细胞凋亡中的作用及其对子痫前期的影响.方法 选取人绒毛膜滋养层细胞,分为4组:对照组、缺氧组、缺氧+miR-491-5p mimic组和缺氧+miR-491-5p inhibit组.采用细胞活力染色检测滋养细胞凋亡情况,qRT-PCR检测miR-491-5p的表达,TargetScan数据库预测miR-491-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miR-149-5p与B-细胞淋巴瘤因子2样蛋白2基因(BCL2L2)的靶向关系.miR-491-5p mimic和inhibitor分别转染滋养细胞后,qRT-PCR检测miR-491-5p的表达,Western blotting检测BCL2L2蛋白的表达改变,细胞活力染色、Western blotting、流式细胞术检测滋养细胞凋亡情况.结果 与对照组比较,缺氧组滋养细胞凋亡率明显增高(P<0.001),miR-491-5p表达明显增高(2.784±0.214 vs.1.000±0.000,P<0.01);生物信息学预测与双荧光素酶检测报告实验显示,miR-491-5p可与BCL2L2结合并调控其表达.与对照组比较,miR-491-5p mimic组miR-491-5p表达明显增高(7659.300±191.300 vs.5.467±0.503,P<0.01),而miR-491-5p inhibit组miR-491-5p表达明显降低(0.139±0.022 vs.0.323±0.035,P<0.05).与缺氧组比较,缺氧+miR-491-5p inhibit组滋养细胞凋亡率降低(11.56%±0.452%vs.16.67%±0.750%,P<0.01),BCL2L2和Bcl-2蛋白相对表达量增高(0.702±0.047 vs.0.312±0.007,P<0.001;0.752±0.055 vs.0.415±0.005,P<0.01),Bax蛋白表达降低(1.221±0.066 vs.1.652±0.085,P<0.05);缺氧+miR-491-5p mimic组滋养细胞凋亡率增高(23.54%±1.233%vs.16.67%±0.750%,P<0.001),BCL2L2和Bcl-2蛋白相对表达量降低(0.211±0.013 vs.0.312±0.007,P<0.01;0.203±0.011 vs.0.415±0.005,P<0.001),Bax蛋白表达增高(2.362±0.284 vs.1.652±0.085,P<0.01).结论 miR-491-5p可负向调控BCL2L2表达,促进缺氧诱导的滋养细胞凋亡,进而加速子痫前期的发展进程.
滋养细胞、miR-491-5p、BCL2L2、细胞凋亡、缺氧
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R714;R392(妇产科学)
国家自然科学基金;宁夏回族自治区重点研发计划;宁夏回族自治区重点研发计划;宁夏自然科学基金项目
2023-03-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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