毒胡萝卜素诱导内质网应激对小鼠调节性T细胞免疫功能的影响

摘要：

目的 探讨内质网应激(ERS)特异性诱导剂毒胡萝卜素(TG)体外刺激对小鼠调节性T细胞(Treg)免疫功能及ERS相关信号通路的影响.方法 采用免疫磁珠分离法分选BALB/c小鼠脾脏Treg,流式细胞术检测其分选纯度.采用流式细胞术检测Treg叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)及细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4)表达的时间及剂量效应关系.Western blotting检测细胞ERS信号通路相关分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、真核细胞转录起始因子2α(eIF2α)、磷酸化eIF2α(p-eIF2α)、转录激活因子4(ATF4)表达/活化水平.将Treg单独或与效应T细胞(Teff)共培养,采用流式细胞术检测Teff的增殖活性,ELISA法检测Treg白细胞介素(IL)-10和转化生长因子(TGF)-β生成以及共培养上清中IL-2、IL-4、干扰素(IFN)-γ水平.结果 磁珠分选Treg的纯度为91.0％.依据Treg Foxp3及CTLA-4表达的时效-量效关系,选定TG 0.1μmol/L和12h为实验刺激浓度和时间.0.1μmol/L TG刺激12h后,Treg中ERS信号通路相关分子GRP78、磷酸化eIF2α、ATF4等表达/活化水平明显上调,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,TG刺激组Treg IL-10和TGF-β分泌量明显增加,其对Teff增殖活性抑制能力明显增强,与Teff共培养上清中IL-4/IFN-γ比值明显升高,IL-2水平明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TG能够有效地活化Treg中ERS相关信号通路,进而显著增强Treg介导的免疫抑制反应.

关键词：调节性T细胞、免疫功能、内质网应激、毒胡萝卜素

所属期刊栏目：43

分类号：R392.12

资助基金：国家自然科学基金81471841,81730057,81170296

在线出版日期：2018-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：459-464