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10.11855/j.issn.0577-7402.2015.11.09

miR-155对HBV蛋白表达的抑制作用及机制

引用
目的 观察miR-155对SOCS1 mRNA及蛋白水平的影响,探究miR-155对HBsAg、HBeAg表达的抑制作用.方法 从HepG2.2.15细胞中提取基因组,经PCR扩增得到miR-155前体序列,纯化并连接入pmR-mCherry载体,构建重组质粒pmiR-155,经去内毒素后转染至HepG2.2.15细胞.将细胞分为重组组(转染pmiR-155质粒)、空载组(转染pmR-mCherry质粒)、转染试剂组、空白组.采用荧光实时定量PCR检测各组细胞内miR-155的表达,RT-PCR检测各组细胞SOCS1 mRNA的表达,Western blotting检测各组细胞SOCS1蛋白的表达,ELISA检测各组细胞HBsAg、HBeAg的表达.结果 荧光实时定量PCR结果显示,以空白组细胞内miR-155的表达量为基准,重组组miR-155表达量(519.43±52.10)明显高于空载组(24.24±16.70)及转染试剂组(35.04±26.09,P<0.05);RT-PCR结果显示,重组组SOCS1 mRNA表达量(0.63±0.91)显著低于空白组(P<0.05);Western blotting结果显示,重组组SOCS1蛋白表达量显著低于空白组.以空白组的表达量为基准,重组组HBsAg和HBeAg蛋白表达的抑制率分别为55.62%±3.77%和47.87%±2.46%(P<0.01).结论 过表达的miR-155可抑制细胞内SOCS1和HBV蛋白的表达.

乙型肝炎、慢性、微RNAs、乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎核心抗原

40

R512.6(传染病)

广州市科技计划项目2013J4100116;This work was supported by the Science and Technology Foundation of Guangzhou 2013J4100116

2015-12-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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解放军医学杂志

0577-7402

11-1056/R

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2015,40(11)

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