大鼠Ⅰ型肺泡上皮细胞的分离、培养及生物学特性研究

摘要：

目的 改良细胞分离方法,得到高纯度的原代Ⅰ型肺泡上皮细胞(AT Ⅰ)并进行培养,初步观察其生物学特性.方法 采用SPF级SD大鼠,通过酶消化法、IgG贴壁法和免疫磁珠法获得高纯度ATⅠ并进行培养,采用台盼蓝染色计算细胞活力,免疫荧光DAPI法鉴定细胞纯度和表型,倒置显微镜观察细胞生长规律,计数法绘制细胞生长曲线.结果 每只体重120g左右的SD大鼠可获得(2.1±0.5)×106个ATⅠ,细胞活力为93.8％±1.6％,细胞纯度为91.0％±0.6％.培养3d后细胞完全黏附、伸展,培养7d后汇合形成单层扁平状.免疫荧光检测显示,培养的原代细胞水通道蛋白5(AQP5)和小窝蛋白1(Cav-1)呈阳性表达,表面活性蛋白C前体(pro-SPC)呈阴性表达.获取的ATⅠ可在体外增殖,生长曲线显示原代ATⅠ在对数增长期的倍增时间约为66h.结论 改良细胞分离方法可以得到高纯度的ATⅠ,培养后细胞生长良好,可为研究以ATⅠ损伤为特征的肺部疾病提供可靠的体外模型.

关键词：肺泡上皮细胞、Ⅰ型、细胞分离、细胞培养技术

所属期刊栏目：39

分类号：R329.28(人体形态学)

在线出版日期：2014-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：374-378