醛固酮自分泌环在高糖致人系膜细胞损伤中的作用
目的 研究高糖环境下人系膜细胞(HMC)中醛固酮自分泌环及活性氧(ROS)、癌胚纤连蛋白(FN)表达水平的变化,进一步探讨醛固酮白分泌环与ROS、癌胚FN mRNA表达的关系.方法 常规培养HMC,取对数生长期细胞分为5组:正糖组(5mmol/L D-葡萄糖),渗透压对照组(5mmol/L D-葡萄糖+20mmol/L L-葡萄糖),正糖+依普利酮组(5mmol/L D-葡萄糖+10μmol/L依普利酮),高糖组(25mmol/L D-葡萄糖),高糖+依普利酮组(25mmol/L D-葡萄糖+ 10 μmol/L依普利酮).采用RT-PCR法检测醛固酮合酶(CYP11B2)、11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ(11 β HSD2)、癌胚FN mRNA表达水平,Western blotting检测CYP11B2蛋白表达水平,放射免疫法分析细胞培养液中醛固酮水平,通过激光共聚焦显微镜观察盐皮质激素受体(MR)蛋白表达及转位情况,荧光显微镜和荧光酶标仪检测细胞内ROS水平.结果 与正糖组比较,高糖组HMC细胞CYP11B2 mRNA及蛋白表达上调,ROS和癌胚FN mRNA表达亦上调,培养液中醛固酮浓度升高(P<0.05).高糖可促进MR蛋白发生核转位,定量分析显示高糖组胞质/胞核荧光强度比值较正糖组降低30%(P<0.05).与高糖组比较,高糖+依普利酮组ROS及癌胚FNmRNA表达下调(P<0.05).结论 高糖负荷可通过激活HMC局部醛固酮自分泌环而导致HMC损伤.
肾小球系膜细胞、醛固酮、自分泌环、纤连蛋白类、活性氧
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R587.24(内分泌腺疾病及代谢病)
2012-11-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
618-622