10.3321/j.issn:0577-7402.2007.04.024
CXCR4反义核酸对结肠癌细胞VEGF-C mRNA表达的影响及体外侵袭的抑制作用
目的 研究趋化因子受体CXCR4反义核酸转染对结肠癌细胞HT-29血管内皮生长因子-C(VEGF-C)mRNA功能性表达和其体外侵袭能力的影响.方法 利用自行设计的引物,借助RT-PCR技术获得两端含不同限制性酶切位点的CXCR4 cDNA片段,反向插入pcDNA 3.1(+)质粒中,构建CXCR4反义真核表达载体.以脂质体转染法将质粒导入HT-29细胞,用RT-PCR检测其对HT-29细胞VEGF-C mRNA表达的影响,Western blot检测HT-29细胞CXCR4蛋白表达的变化,MTT法测定HT-29细胞的生长曲线,体外侵袭实验观察转染前后HT-29细胞体外侵袭能力的变化.结果 成功构建了CXCR4反义重组质粒.与未转染(HT-29)组表达的VEGF-C mRNA相比,CXCR4反义核酸转染(HT-29tran)组的表达量下降54.2%,而空白质粒转染(HT-29KZ)组的表达量仅下降9.4%,HT-29tran组和HT-29KZ组相比差异显著(P<0.01).穿膜细胞百分率HT-29tran组为61.3%±5.8%,而HT-29KZ组为93.7%±7.8%,两组相比差异显著(P<0.05).结论 CXCR4反义核酸转染可明显抑制HT-29细胞VEGF-C mRNA的表达,并可显著降低HT-29细胞的体外生长和侵袭能力.
受体、CXCR4、RNA、反义、血管内皮生长因子C、结肠肿瘤
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R735.35(肿瘤学)
2007-06-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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