乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP4的克隆化研究

摘要：

目的筛选并克隆乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)反式激活新型靶基因.方法以HBxAg表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析,应用生物信息学方法对所获基因片段序列进行分析发现,其中之一为新型基因片段,与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性.通过序列同源性搜索、比对和电子拼接,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列,确定新型基因序列.从转染了pcDNA3.1(-)-X的HepG2细胞提取总RNA,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增,获得阳性克隆之后,进行鉴定并对克隆的基因及其编码产物的序列进行分析.结果该新基因的编码序列全长为348个核苷酸(nt),编码产物由116个氨基酸残基(aa)组成,并测序证实,命名为XTP4,在GenBank中注册,注册号为AF490253.结论通过分子生物学技术与生物信息学技术的结合,发现并鉴定、克隆HBxAg反式激活作用的新型靶基因XTP4,为进一步研究HBxAg反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础.

关键词：肝炎病毒、乙型、X蛋白、反式激活、基因克隆化

所属期刊栏目：29

分类号：R512.63(传染病)

资助基金：军队杰出人才基金98H038;国家自然科学基金C030114020,C30070689;军队科技攻关项目98D063;军队科技攻关青年基金01Q138

在线出版日期：2004-06-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：380-382