重组人抗-HBs单链抗体与白细胞介素2融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

摘要：

目的探讨抗-HBs单链抗体与白细胞介素2融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定方法.方法将构建的目的蛋白表达工程菌M15[pQE-ScFv-IL-2]经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达产物;再通过Ni2+离子金属螯合亲和层析和离子交换层析纯化目的蛋白;采用逐步透析法对纯化后的目的蛋白进行复性后,用间接ELISA实验和CTLL-2细胞增殖反应实验对其进行活性鉴定.结果 SDS-PAGE及Western blot分析结果显示有分子量约为43kD的重组蛋白表达,表达量可达18%;两步纯化后凝胶成像分析目的蛋白的纯度达到95%;复性后纯化产物的活性鉴定结果表明,重组抗体融合蛋白既能与HBsAg特异性结合,也能刺激CTLL-2细胞增殖.结论获得的抗体融合蛋白兼具亲本分子的双特异性,为慢性乙型肝炎及相关疾病的导向治疗研究打下了良好基础.

关键词：单链抗体、白细胞介素2、融合蛋白

所属期刊栏目：29

分类号：R392.11

在线出版日期：2004-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：153-155