肝细胞内与HBeAg结合的新蛋白编码基因E-36的筛选与克隆

摘要：

目的探讨HBeAg在乙型肝炎病毒(HBV)致病过程中所起的作用.方法利用酵母双杂交系统3筛选并克隆人肝细胞cDNA文库中与HBeAg有相互作用的蛋白的基因.将HBeAg编码基因克隆入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒pACT2的酵母细胞Y187进行配合,双重筛选阳性菌落,提取质粒并测序.结果通过行生物信息学分析,发现其中有1个未知基因,命名为E-36.结论根据GenBank中的序列信息设计引物,从HepG2细胞中扩增出E-36新基因的完整序列并克隆到另一酵母表达载体pGADT7中,并用体外免疫共沉淀方法再次验证了HBeAg与E-36新蛋白之间有结合作用,为HBeAg的功能研究提供了新线索.

关键词：肝炎E抗原、乙型、基因、双杂交系统技术

所属期刊栏目：28

分类号：R512.63(传染病)

资助基金：国家自然科学基金C39970674,C03011402,C30070689,39900130;军队科技攻关青年基金01Q138;军队科技攻关项目01MB135;军队杰出人才基金98H038

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1077-1079