10.3321/j.issn:0577-7402.2001.06.012
慢性髓系白血病bcr-abl融合基因在真核细胞中的表达
克隆慢性髓系白血病(CML)融合基因bcr-abl融合位点周围的cDNA序列,构建重组真核表达载体并表达于p815细胞,探索bcr-abl基因免疫治疗CML的可行性。设计两条引物扩增bcr-abl融合位点周围468bp的cDNA,测序正确后,将其克隆至真核表达载体pcDNA 3.1,通过电穿孔法转染至p815 细胞中,应用G418筛选阳性细胞克隆,在含10%FCS的RPMI1640中常规培养,收集细胞进行RT-PCR鉴定。结果PCR扩增出了可用于基因免疫的位于bcr-abl融合基因位点周围的468bp的cDNA,序列测定除第448位碱基C突变为T外其余序列均正确;构建了重组真核表达载体,并用电穿孔法将其转染p815细胞,RT-PCR法检测到该细胞系有bcr-abl mRNA水平的表达。
克隆、分子、融合蛋白质类、bcr-abl、RNA、转移
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Q786(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金39770336;陕西省科研项目98SM40
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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