高效液相色谱串联质谱法检测末梢全血中25-羟维生素D含量的方法及其临床应用

摘要：

目的 建立快速、灵敏的微量末梢全血样本中 25-羟维生素D2 和 25-羟维生素D3 的高效液相色谱串联质谱检测方法,并分析苏州地区 0～14 岁儿童的 25-羟维生素D营养状况.方法 采用甲醇蛋白沉淀和正己烷液液萃取进行样本前处理,上清液氮气吹干,80％乙腈复溶后,使用高效液相色谱串联质谱(ESI+)多反应监测模式、同位素内标法检测 25-羟维生素D2 和 25-羟维生素D3 的含量,对方法进行验证,并分析苏州地区 2858 例 0～14 岁体检儿童的 25-羟维生素 D 营养状况.结果 25-羟维生素D2 和 25-羟维生素 D3 在 2.50～125.00 ng·ml-1 浓度范围内线性良好,线性相关系数分别为 0.9997、0.9998.25-羟维生素D2 低浓度质控样本和高浓度质控样本的批内和批间精密度均<6.5％,准确度为 97.3％～105.5％;25-羟维生素D3 低浓度质控样本和高浓度质控样本的批内和批间精密度均<8.6％,准确度为 88.7％～102.2％.经考察无明显基质效应,样本可在常温(25℃)稳定保存 3 d,可在 4℃稳定保存 7 d.2858 例儿童 25-羟维生素D检测结果显示秋季水平较高,为 35.96(27.81～44.04)ng·ml-1,4 个季节间的数据差异有统计学显著差异(P<0.01);随着年龄的增长,25-羟维生素D水平呈下降趋势,0～12 个月儿童的水平最高,为 36.90(26.56～45.80)ng·ml-1,8～14 岁组水平最低,为 16.91(13.41～23.46)ng·ml-1,4 个年龄组间的数据差异有统计学显著差异(P<0.01).结论 本研究建立了高效液相色谱串联质谱法测定微量末梢全血中 25-羟维生素D2 和 25-羟维生素D3 的方法,简单快捷、灵敏度高、准确度好,可应用于临床.

关键词：末梢全血、25-羟维生素D、高效液相色谱串联质谱法

所属期刊栏目：36

分类号：R937.1(生药学（天然药物学）)

资助基金：苏州民生科技项目;吴江科教兴卫项目

在线出版日期：2023-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：60-66