成胶质细胞瘤U87干细胞样细胞的培养及其代谢表型与成瘤能力鉴定

摘要：

目的 培养成胶质细胞瘤U87 干细胞样细胞(U87 SLCs),检测其干性标志物的水平、线粒体呼吸能力和体内成瘤能力.方法 DMEM/F-12 中添加B-27 以及生长因子EGF和bFGF作为无血清干细胞培养基培养U87 SLCs;悬浮培养U87 SLCs使用神经球培养法,贴壁培养U87 SLCs通过在培养表面包被Matrigel基质胶实现;通过RT-qPCR和Western blot检测培养物的干性标志物mRNA和蛋白质水平;通过流式细胞测量术检测培养物中CD133+细胞的比例;通过Seahorse实时细胞代谢分析检测细胞耗氧速率的变化;通过接种动物皮下移植瘤验证细胞成瘤能力的改变.结果 干细胞培养基中的U87 SLCs在 1 周内即会成长为典型的细胞球形态,细胞球在培养过程中会不断增大;在贴壁剂合适的浓度下,U87 SLCs可以在干细胞培养基中完好地平铺贴壁增殖;CD133、nestin、OLIG2、CD44、CD15、整合素α6(ITGA6)等干性标志物的mRNA表达水平在两种方式培养后与U87 相比均显著提升(P＜0.05),CD133 和nestin的蛋白水平在两种方式培养后也均升高(P＜0.05);U87 SLCs展现出了更高的线粒体储备呼吸能力(P＜0.05);U87 SLCs能够以更少的接种细胞数形成更大的皮下肿瘤(P＜0.05),U87 SLCs体内增殖更加迅速,具有更强的成瘤能力.结论 U87 SLCs具有典型的干性特征,是一个良好的干性更高的肿瘤细胞模型.

关键词：成胶质细胞瘤、干细胞样细胞、神经球、干性

所属期刊栏目：44

分类号：R739.41(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;北京市自然科学基金;医学与健康科技创新工程

在线出版日期：2024-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：16-22