LncRNA FGD5-AS1调节miR-93-5p/BMP2轴促进人骨髓间充质干细胞成骨分化

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1 调节微小RNA miR-93-5p/骨形态发生蛋白-2(BMP2)轴对人骨髓间充质干细胞(hBM-MSCs)成骨分化的影响.方法 取对数增殖期的hBM-MSCs,分别检测成骨分化前、后lncRNA FGD5-AS1、miR-93-5p、BMP2 mRNA 表达水平;将细胞分别转染或共转染 pcDNA FGD5-AS1、miR-93-5p inhibitor、miR-93-5p mimics及相应阴性对照,分组为pcDNA NC组、pcDNA FGD5-AS1 组、inhibitor NC组、miR-93-5p inhibitor组、pcDNA FGD5-AS1+mimics NC组、pcDNA FGD5-AS1+miR-93-5p mimics组,取未转染细胞作为空白组;CCK-8法检测细胞增殖;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测其活性;茜素红染色鉴定细胞矿化结节形成;Western blot检测BMP2 及成骨相关标志物——骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、成骨相关转录因子(OSX)水平;双荧光素酶报告基因实验分别验证miR-93-5p与FGD5-AS1、BMP2 的靶向关系.结果 miR-93-5p分别与FGD5-AS1、BMP2 存在靶向关系.与分化前相比,hBM-MSCs成骨分化后lncRNA FGD5-AS1、BMP2 mRNA表达显著增加,miR-93-5p表达显著下降(P＜0.05);与pcDNA NC组相比,pcDNA FGD5-AS1 组FGD5-AS1 表达显著增加(P＜0.05),表明转染成功.后续实验发现矿化结节产生、细胞增殖、ALP活性及BMP2、OCN、OPN、OSX表达均显著增加(P＜0.05);与inhibitor NC组相比,miR-93-5p inhibitor组miR-93-5p表达降低,表明转染成功.后续实验发现矿化结节产生、细胞增殖、ALP活性及BMP2、OCN、OPN、OSX表达均显著增加(P＜0.05);miR-93-5p过表达可抑制FGD5-AS1 对细胞成骨分化的促进作用(P＜0.05).结论 上调FGD5-AS1 可以促进细胞成骨分化,可能与miR-93-5p/BMP2 轴有关.

关键词：人骨髓间充质干细胞、lncRNA FGD5-AS1、miR-93-5p/BMP2轴、成骨分化

所属期刊栏目：43

分类号：R394.2

资助基金：国家自然科学基金82160431

在线出版日期：2023-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1179-1185