生物钟蛋白CRY1抑制AngⅡ 诱导的小鼠主动脉平滑肌细胞表型蛋白标志物变化

摘要：

目的 探讨生物钟(circadian clock)相关蛋白隐花色素1(CRY1)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化中的作用.方法 将VSMCs分为对照(control)组和实验组,用不同浓度AngⅡ处理VSMCs不同时间,RT-PCR和Western blot检测收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、合成型标志物骨桥蛋白(OPN)及CRY1 mRNA和蛋白的表达;分别构建CRY1的干扰RNA(siCRY1)、YAP1的干扰RNA(siYAP1)进行基因沉默,构建CRY1的过表达质粒(pcDNA-CRY1)进行过表达,RT-PCR、Western blot双重验证各基因组mRNA和蛋白的表达;将VSMCs分为4组,对照组、AngⅡ组、AngⅡ+siCRY1组、AngⅡ+pcDNA-CRY1组,将siCRY1、siYAP1、pcDNA-CRY1转染至经AngⅡ处理VSMCs中,RT-PCR和Western blot检测α-SMA、OPN、CRY1、YAP1 mRNA和蛋白的表达及CCK-8法检测细胞增殖情况.结果 不同浓度AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,VSMCs收缩型标志物表达减少,VSMCs合成型标志物表达增加,CRY1表达减少;转染siCRY1、siYAP1、pcDNA-CRY1处理VSMCs后,CRY1在siCRY1组中表达下降,在pcDNA-CRY1组中表达升高,YAP1在siYAP1组中表达下降,在siCRY1组中表达升高;转染siCRY1进一步减少AngⅡ诱导VSMC收缩型标志物的表达(P<0.05),增加合成型标志物、YAP1的表达,以及促进VSMCs的增殖(P<0.05);转染pcDNA-CRY1质粒增加AngⅡ诱导VSMCs收缩型标志物的表达(P<0.05),减弱合成型标志物YAP1的表达(P<0.05)及抑制VSMCs的增殖(P<0.05).结论 生物钟蛋白CRY1抑制AngⅡ诱导的小鼠主动脉VSMCs表型蛋白标志物变化和增殖,该过程可能与Hippo-YAP信号通路有关.

关键词：隐花色素1、Yes相关蛋白1、血管紧张素Ⅱ、表型转化

所属期刊栏目：43

分类号：R329.2;R363(人体形态学)

资助基金：西南医科大学附属医院博士科研启动基金;四川省卫生健康委员会医学科技项目

在线出版日期：2023-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：588-595