利用类器官培养构建小鼠肝脏衰老模型

摘要：

目的 利用类器官培养构建体外快速诱导的小鼠肝脏衰老模型.方法 通过两步灌注法获取小鼠肝细胞并对其进行类器官培养.通过形态学、qPCR和免疫荧光对类器官进行初步鉴定,通过检测其对LDL的摄取能力判断肝脏类器官的功能.用油酸(OA)处理肝脏类器官,检测其生长情况、衰老相关分泌表型、LDL的摄取能力和肝细胞活性氧(ROS)水平,分析肝脏衰老模型构建是否成功.进一步使用N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理肝细胞,检测以上表型和功能的变化,利用此模型探究ROS对衰老的影响.结果 两步灌注法获取到大量有活性的原代小鼠肝细胞,通过在基质胶中3D培养可获得具有自我复制能力的肝脏类器官,qPCR显示其表达肝脏标志基因,免疫荧光结果显示其高表达白蛋白(ALB),并且肝脏类器官具有对LDL正常的摄取功能.用油酸处理后,肝脏类器官生长减慢,衰老相关分泌表型基因表达上调(P<0.001),对LDL的摄取能力降低(P<0.001),ROS明显上升(P<0.001).

关键词：原代肝细胞、类器官、油酸、活性氧、衰老

所属期刊栏目：43

分类号：Q691

资助基金：国家自然科学基金82003145

在线出版日期：2023-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：554-559