miR-99a通过下调RRM2抑制人子宫颈癌HeLa细胞系增殖、迁移和侵袭

摘要：

目的 探讨miR-99a与核糖核苷酸还原酶小亚基M2(RRM2)的靶向关系,并分析二者对人子宫颈癌(CC)HeLa细胞系增殖、侵袭及迁移的影响.方法 将HeLa细胞,分为对照组(control)、阴性对照组(inhibitor-NC)、抑制miR-99a表达组(miR-99a-inhibitor)、共转染组(RRM2-siRNA+miR-99a-inhibitor).MTT法、平板集落实验检测细胞增殖;划痕实验、Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭;Western blot检测RRM2、细胞增殖核抗原(PCNA)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、N-钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)蛋白表达;免疫荧光法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin定位及表达;生物信息学及双荧光素酶报告基因实验验证miR-99a与RRM2靶向关系;RT-qPCR检测细胞中miR-99a、RRM2 mRNA水平.结果 下调miR-99a表达,可增高HeLa细胞增殖率(100.00比128.86±4.25,P<0.05);上调集落形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数;增加RRM2、PCNA、N-cadherin与vimentin蛋白表达,降低E-cadherin蛋白表达(P<0.05).抑制RRM2表达能减轻下调miR-99a对HeLa细胞生物学行为的影响(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验及RT-qPCR证实miR-99a与RRM2存在靶向关系(P<0.05).结论 抑制miR-99a可能靶向上调RRM2表达并促进HeLa细胞增殖,有望成为CC新的潜在治疗靶点.

关键词：miR-99a、核糖核苷酸还原酶小亚基M2、宫颈癌细胞、增殖、迁移

所属期刊栏目：42

分类号：R737(肿瘤学)

资助基金：荆门市科学技术研究与开发计划项目2019YDKY049

在线出版日期：2022-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1737-1743