10.16352/j.issn.1001-6325.2022.11.1709
白藜芦醇缓解低氧/复氧诱导的TCMK1细胞线粒体自噬
目的 研究白藜芦醇(Res)对低氧/复氧(H/R)导致小鼠肾小管上皮细胞系TCMK1内线粒体功能及线粒体自噬的影响.方法 体外建立H/R细胞模型,经Res或(和)线粒体自噬抑制剂1(Mdivi-1)预处理TMCK1细胞2 h,采用CCK8法检测TCMK1细胞存活率;试剂盒法检测钙离子超负荷情况;流式细胞测量术测定线粒体膜电位(MMP)变化和活性氧(ROS)含量;Western blot检测线粒体融合蛋白(OPA)、分裂蛋白(DRP)以及凋亡相关蛋白cleaved caspase-3,Bax,Bcl2表达;免疫荧光检测线粒体外膜转位酶(TOMM20)和自噬溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)共定位情况.结果 与对照组相比,H/R组TCMK1细胞存活率显著减低(P<0.05),细胞内钙离子、ROS及MMP含量显著减低(P<0.05),OPA表达显著减低(P<0.05),同时DRP表达显著增高(P<0.05),线粒体与LAMP2共定位的细胞数目显著减少;与H/R组相比,10μmol/L Res可以显著增加TMCK1细胞的存活率(P<0.05),抑制细胞内ROS的释放、钙离子超负荷及MMP的下降(P<0.05),同时促进OPA表达而抑制DRP表达(P<0.05),增加线粒体与LAMP2共定位的细胞数目.与(H/R+Res)组相比,在其基础上给予Mdivi-1后,凋亡执行蛋白Bax、cleaved caspase-3蛋白表达升高,抗凋亡蛋白Bcl2表达降低(P<0.05).结论 Res缓解H/R诱导的TCMK1细胞损伤,至少部分通过激活线粒体自噬,维护线粒体动力学稳态而实现.
白藜芦醇、低氧/复氧、TCMK1细胞、线粒体自噬
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R572(消化系及腹部疾病)
江西省卫生健康委员会科技计划项目;江西省卫生健康委员会科技计划项目;江西省中医药科技计划
2022-11-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
1709-1715