过表达miR-217调控EZH2促进骨质疏松模型小鼠BM-MSCs成骨分化

摘要：

目的 探究微小RNA-217(miR-217)对骨质疏松症(OP)模型小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)成骨分化的影响及其可能调控机制.方法 将小鼠分为OP组、假手术(sham)组,各12只,均进行了双侧卵巢切除术.将OP小鼠BM-MSCs分为对照组、miR-NC组、miR-217 mimics组、miR-217 mimics+pcDNA 3.1组、miR-217 mimics+pcDNA 3.1-EZH2(果蝇zeste基因增强子同源物2)组,分别不做转染、转染miR-NC、转染miR-217 mimics、转染miR-217 mimics及pcDNA 3.1、转染miR-217 mimics及pcDNA 3.1-EZH2,之后进行成骨诱导分化.RT-qPCR/Western blot检测miR-217及EZH2、OCN、Runx2、collagenⅠmRNA和蛋白表达情况;酶标仪检测各组BM-MSCs碱性磷酸酶(ALP)活性;利用茜素红S(ARS)染色测定法对各组BM-MSCs进行染色,观察染色情况;双荧光素酶报告基因验证miR-217与EZH2的靶向关系.结果 OP组小鼠骨组织及BM-MSCs中miR-217表达水平低于sham组(P<0.05),EZH2 mRNA表达水平高于sham组(P<0.05).miR-217 mimics组BM-MSCs中miR-217表达水平,OCN、Runx2、col-lagenⅠmRNA和蛋白表达水平,ALP活性高于对照组和miR-NC组(P<0.05),EZH2 mRNA及蛋白表达水平低于对照组和miR-NC组(P<0.05),ARS染色程度重于对照组和miR-NC组.miR-217 mimics+pcDNA 3.1-EZH2组BM-MSCs中EZH2 mRNA及蛋白表达水平高于miR-217 mimics组、miR-217 mimics+pcDNA 3.1组(P<0.05),OCN、Runx2、collagenⅠmRNA和蛋白表达水平,ALP活性低于miR-217 mimics组、miR-217 mimics+pcDNA 3.1组(P<0.05),ARS染色程度轻于miR-217 mimics组、miR-217 mimics+pcDNA 3.1组.miR-217与EZH2 mRNA 3'UTR区有结合位点,WT-EZH2+miR-217 mimics组荧光素酶相对活性低于WT-EZH2+miR-NC组(P<0.05).结论 过表达miR-217可通过靶向抑制EZH2表达,促进OP小鼠BM-MSCs成骨分化,为临床防治OP提供新策略.

关键词：微小RNA-217、果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)、骨髓间充质干细胞(BM-MSC)、骨质疏松症

所属期刊栏目：42

分类号：R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：武汉市卫生健康委员会资助项目

在线出版日期：2022-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1406-1413