针对SARS⁃CoV2不同突变株广谱特异性中和抗体的筛选与鉴定

摘要：

目的 筛选对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS?CoV2)不同突变株具有广谱特异性的、高亲和性中和抗体,并进行功能验证.方法 用脂质体包被的SARS?CoV2刺突蛋白(S蛋白)mRNA疫苗对Balb/c小鼠进行2次免疫,测定小鼠血清中特异性抗体含量,选取抗体含量较高的小鼠进行冲击免疫;取冲击免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,用有限稀释法和ELISA筛选出上清能特异性结合S蛋白及S蛋白受体结合域(RBD)的杂交瘤细胞克隆;纯化单克隆抗体,进行假病毒中和实验,验证抗体中和活性;并通过ELISA筛选对4种SARS?CoV2突变株的重组RBD蛋白具有广谱结合特性的单克隆抗体.结果 经2次免疫,检测到高剂量组4号小鼠血清中针对S蛋白的抗体含量最高;经过冲击免疫、细胞融合后,共筛选到12株与S蛋白具有结合活性的杂交瘤细胞,其中9株特异性结合RBD蛋白;假病毒中和实验结果显示,41、46和47这3株抗体在体外有显著的中和病毒活性(P<0.05);与另2株抗体相比,46号抗体显示出与SARS?CoV24种包括Omicron在内的突变株的RBD蛋白的广谱结合活性.结论 46号抗体是对SARS?CoV2四种不同突变株具有广谱特异性的中和抗体,有望进一步进行人源化改造,用于新型冠状病毒肺炎(COVID?19)的治疗.

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV2)、杂交瘤细胞、广谱中和抗体

所属期刊栏目：42

分类号：R392

资助基金：国家自然科学基金;中国医学科学院创新工程;广谱抗呼吸道病毒药物与抗体研发特色实验细胞资源建设2021?I2M?1?053

在线出版日期：2022-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：752-757