miR-133a-3p靶向调控CD2AP基因减轻RSV感染的人支气管上皮细胞系16-HBE损伤

摘要：

目的 探讨miR-133a-3p对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的支气管上皮细胞凋亡、炎性反应的影响及其对CD2相关蛋白(CD2AP)的调控作用.方法 收集59例支气管哮喘儿童的支气管黏膜组织标本为AsP组,同时选取59例支气管扩张非哮喘儿童的支气管黏膜组织标本为NC组,用RT-qPCR法检测组织中miR-133a-3p、CD2AP的表达量;RSV感染支气管上皮细胞(16-HBE)建立细胞损伤模型(RSV组),分别将miR-NC、miR-133a-3p mimics、si-NC、si-CD2AP、pcDNA-NC、pcDNA-CD2AP、miR-133a-3p mimics与pcDNA-NC、miR-133a-3p mimics与pcDNA-CD2AP转染至感染RSV的16-HBE细胞;用RT-qPCR法与Western blot法分别检测细胞中miR-133a-3p、CD2AP的表达量;用ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-1α的水平;用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测miR-133a-3p与CD2AP的靶向关系;Western blot法检测cleaved-caspase-3蛋白表达量.结果 与NC组比较,AsP组支气管黏膜组织中miR-133a-3p的表达水平降低(P<0.05),CD2AP mRNA的表达水平升高(P<0.05);RSV感染的16-HBE细胞中miR-133a-3p的表达水平降低(P<0.05),CD2AP的表达水平及TNF-α、IL-6、IL-1α的水平升高(P<0.05),凋亡率及cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05);RSV感染的16-HBE细胞中转染miR-133a-3p mimics或转染si-CD2AP可明显降低TNF-α、IL-6、IL-1α的水平、凋亡率及cleaved-caspase-3蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实CD2AP是miR-133a-3p的靶基因;共转染miR-133a-3p mimics与pcDNA-CD2AP可明显逆转miR-133a-3p mimics对16-HBE细胞凋亡及炎性反应.结论 miR-133a-3p过表达可通过负向调控CD2AP的表达而抑制RSV感染的支气管上皮细胞炎性反应及凋亡,从而减轻细胞损伤.

关键词：miR-133a-3p;CD2AP;呼吸道合胞病毒;支气管上皮细胞;凋亡;炎性反应

所属期刊栏目：41

分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：武汉市卫生健康科研基金资助项目WX19C36

在线出版日期：2021-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1463-1469