10.3969/j.issn.1001-6325.2021.10.001
分子伴侣Rer1参与人胚胎肾上皮细胞系HEK293T中hERG钾通道蛋白转运
目的 探讨分子伴侣Rer1在hERG钾通道蛋白转运中的作用机制,并进行可能恢复hERG转运异常的药物Baf A1研究.方法 将A561V突变体及野生型hERG载体瞬时转染人胚胎肾上皮细胞系(HEK293T),建立野生、突变及混合转染细胞模型;运用免疫荧光、蛋白免疫印迹检测hERG及Rer1的表达;采用小干扰RNA技术敲低Rer1表达后检测hERG蛋白的表达;V-ATP酶抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1)以1 mmol/L孵育各组细胞6 h后Western blot检测hERG蛋白表达;用膜片钳对有潜在功能的混转细胞给予Baf A1孵育后测定膜电流.结果 与野生组相比,A561V突变可致hERG蛋白转运缺陷并表现不同条带水平,突变组hERG蛋白的膜表达明显减少(P<0.01);Rer1在突变、混转组中表达明显下降(P<0.01),进一步敲低Rer1后可促进部分相对成熟hERG蛋白的顺向转运;此外,与对照组相比,Baf A1孵育可使野生、突变组中成熟hERG蛋白明显增加(P<0.05),混转组中未成熟hERG蛋白则显著上调(P<0.05);而在混转细胞中,Baf A1孵育可使尾电流相对密度明显增强(P<0.05).结论 Rer1参与hERG钾通道蛋白的转运,并能抑制部分异常hERG蛋白在细胞中的顺向转运,Baf A1能明显增强混转细胞的尾电流密度.
分子伴侣;Rer1;hERG;LQTS
41
R54(心脏、血管(循环系)疾病)
国家自然科学基金;浙江省自然科学基金;宁波市自然科学基金;宁波市鄞州区科技局项目
2021-10-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
1403-1409