miR-338-3p通过负性调节cPKCγ表达减轻小鼠神经元缺血损伤

摘要：

目的 评估miR-338-3p对氧糖剥夺(OGD)/复糖复氧(R)神经元损伤的影响及其机制.方法 建立小鼠脑中动脉阻塞(MCAO)和神经元氧糖剥夺(OGD)模型;Western blot检测1 h MCAO/R 24、48和72 h小鼠脑梗死区周围皮质(n=5)和1 h OGD/R 0、6、12和24 h神经元(n=5)cPKCγ蛋白表达量;实时定量PCR检测cPKCγ及miR-338-3p mRNA水平;生物信息学分析cPKCγ3'UTR与miR-338-3p结合位点;噻唑兰(MTT)比色法和乳酸脱氢酶(LDH)法测定神经元(n=6)的存活率和凋亡率.采用免疫荧光与高内涵细胞成像分析技术(HCA)检测caspase-3蛋白表达情况.结果 1 h MCAO/R 24、48和72 h小鼠脑梗死区周围皮层和1 h OGD/R 0、6、12和24 h神经元中cPKCγ蛋白及mRNA水平均明显上升(P<0.001);cPKCγ3'UTR存在1个miR-338-3p结合位点,miR-338-3p与cPKCγmRNA水平呈相反趋势;过表达miR-338-3p后1 h OGD/R 24 h神经元存活率下降(P<0.001),调亡率上升(P<0.001),caspase-3蛋白平均荧光强度值增高(P<0.001),抑制miR-338-3p后1 h OGD/R 24 h神经元存活率上升(P<0.001),调亡率下降(P<0.001),caspase-3蛋白平均荧光强度值降低(P<0.001).结论 miR-338-3p通过负性调节cPKCγ表达而使神经元存活率上升,凋亡率下降,减轻缺血神经元损伤.

关键词：miR-338-3p、蛋白激酶Cγ、大脑中动脉阻断、氧糖剥夺

所属期刊栏目：40

分类号：R743.3(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金;甘肃省自然科学基金

在线出版日期：2020-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：917-922