miR-150-5p靶向SIRT1提高肝癌细胞系HepG2放疗敏感性

摘要：

目的 探究miR-150-5p靶向SIRT1提高肝癌细胞放射敏感性的作用机制.方法 用分次放疗放射递增法诱导建立放射抵抗型细胞株(RR-HepG2);RT-qPCR检测HepG2和RR-HepG2在不同放射剂量下miR-150-5p的表达水平;细胞克隆实验检测相同放射剂量下两种细胞的放疗敏感性;流式细胞计量术和Western blot检测过表达miR-150-5p对HepG2凋亡的影响;双荧光素酶报告基因法检测miR-150-5p与SIRT1的关联;细胞克隆实验和Western blot检测过表达SIRT1后,细胞的放疗敏感性和凋亡蛋白的变化.结果 与亲代HepG2比较,相同放射剂量下,RR-HepG2组miR-150-5p的表达量均显著降低(P<0.05);放射处理后,与control、agomiR-NC组比较,agomiR-150-5p组的细胞存活分数显著降低,敏感性高(P<0.05),Bax、caspase-9蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率显著升高;双荧光素酶报告基因法验证miR-150-5p靶向调控SIRT1.与agomiR-NC组比较,野生型(WT)agomiR-150-5p荧光素酶活性显著降低,SIRT1蛋白水平显著降低(P<0.05);与anta-agomiR-NC比较,野生型(WT)anta-agomiR-150-5p荧光素酶活性显著升高,SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05);放射处理后,与agomiR-NC组比较,agomiR-150-5p组的细胞存活分数显著降低,Bax、caspase-9蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与agomiR-150-5p+vector组比较,agomiR-150-5p+SIRT1组的细胞存活分数显著升高,Bax、caspase-9蛋白表达水平显著降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05).结论 miR-150-5p靶向SIRT1,下调其表达,提高肝癌细胞放射敏感性,可为临床肝癌放射治疗增敏提供靶点.

关键词：miR-150-5p、SIRT1、肝癌、放疗敏感性

所属期刊栏目：40

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：海南省卫生计生行业科研项目18A200157

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：321-327