人穿孔素在sf9昆虫细胞中的表达和纯化

摘要：

目的 建立重组人穿孔素的表达和快速纯化方法.方法 在sf9昆虫细胞内表达带His标签人穿孔素.使用人工制作简易的镍(Ni)柱装置进行蛋白质亲和层析.采用考马斯亮蓝染色、银染法及流式细胞计量术纯化的蛋白分析其理化性质;用人乳腺癌细胞MCF-7的PI染色法鉴定其生物学活性.结果 纯化出的穿孔素具有在细胞膜打孔的生物学活性.与常规蛋白纯化方法如离子交换色谱、分子筛和疏水作用层析等方法相比,该方法操作简便、成本低,为人穿孔素接下来的研究以及其他蛋白质的纯化提供一定参考.结论 以一种简单的方法在sf9昆虫细胞内表达并纯化出了有活性的人穿孔素.

关键词：蛋白纯化、人穿孔素、蛋白活性、打孔

所属期刊栏目：40

分类号：Q81(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金81802847,81702825

在线出版日期：2020-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：54-59