上调Keap-1抑制Nrf-2核转运和降低卵巢癌细胞Skov3/DPP对顺铂耐药

摘要：

目的 分析Keap-1/Nrf-2通路在耐顺铂(eis-pt)的卵巢癌细胞Skov3/DDP中的活化状态,及其对细胞耐药的影响.方法 构建pFlag-CMV-Keap-1过表达载体.细胞分4组:空白、cis-pt、Keap-1过表达及cis-pt联合Keap-1过表达组;Western blot检测Keap-1和Nrf-2蛋白表达及亚细胞定位;流式细胞计量术分析细胞的凋亡;DHE探针检测胞内活性氧簇(ROS)积累效应.结果 相比Skov3,Skov3/DDP细胞中Keap-1水平明显下调(P＜0.05),Nrf-2在细胞核中含量增多(P＜0.05);过表达Keap-1后,Keap-1水平明显增加(P＜0.05);细胞核中Nrf-2含量明显减少(P＜0.05);20 mg/L顺铂能够明显诱导凋亡,24及48 h的凋亡率分别为24.36％和53.81％,显著高于未过表达Keap-1组(P＜0.05),并激活caspase-3及PARP;DHE过表达Keap-1联合顺铂能够明显诱导ROS在细胞内累积.结论 Nrf-2能够在药物刺激时降低ROS保护细胞,Skov3/DDP细胞中Keap-1表达下调导致Nrf-2活化入核,可能与药物作用时ROS的毒性作用降低及细胞耐药有关.

关键词：卵巢癌、顺铂耐药、Keap-1、Nrf-2、ROS

所属期刊栏目：37

分类号：R737.2(肿瘤学)

资助基金：重庆三峡医药高等专科学校重大项目2016zdxm023

在线出版日期：2017-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：994-999