寨卡病毒NS4A蛋白影响小鼠大脑皮质神经元的迁移

摘要：

目的 在体研究寨卡病毒(Zika virus) NS3和NS4A蛋白对大脑皮质神经元迁移的影响.方法 通过cDNA末端快速扩增技术(RACE)及反转录PCR测定Zika病毒SZ01株基因组的开放阅读框,确定NS3和NS4A蛋白编码序列,构建融合Flag标签的pCIG蛋白表达载体.通过子宫内电转技术在E13.5 d小鼠的大脑皮质的神经前体细胞中表达病毒蛋白.免疫组化检测Flag标签、TBR1与eGFP,观察表达NS3和NS4A蛋白的细胞在E18.5 d大脑皮质中的分布,评估Zika病毒蛋白对大脑皮质神经元迁移的影响.结果 1)NS4A的氨基酸序列与NCBI数据库一致,NS3存在1处氨基酸位点突变.2)Flag标签荧光信号与eGFP荧光共定位,提示eGFP可以指示病毒蛋白在皮质中的表达.3)TBR1荧光显示在体表达NS4A后,神经元的分布与pCIG对照组及表达NS3相比有显著差异(P＜0.001).结论 在体表达Zika病毒的NS4A蛋白可能影响神经元迁移.

关键词：寨卡病毒、NS4A蛋白、子宫内电转、神经元迁移

所属期刊栏目：37

分类号：Q939.93(微生物学)

资助基金：国家重点研发计划2016YFA0100702,2016YFC0902502;重点基础研究发展计划2013CB531304;国家自然科学基金31301152,31370789,31670789,31671316,31640055;医科院创新基金CIFMS,2016-I2M-2-001,2016-I2M-1-001,2016-I2M-1-004

在线出版日期：2017-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：988-993