10.3969/j.issn.1001-6325.2017.06.002
添加细胞因子优化人外周血γδ T细胞的体外扩增培养体系
目的从添加细胞因子角度,优化用于肿瘤过继免疫治疗的γδ T细胞体外扩增培养方案. 方法在固相化抗TCR γδ抗体加IL-2扩增人外周血γδ T细胞的体系基础上,添加其他的γ链受体家族细胞因子,包括IL-7、IL-15或IL-21,单独或联合使用、长期使用或短时添加,通过流式细胞术检测γδ T细胞纯度、细胞增殖及细胞毒活性相关分子的表达,计算γδ T细胞扩增效率;乳酸脱氢酶法检测γδ T细胞对人Burkitt`s淋巴瘤细胞系Daudi的细胞毒活性.结果单独使用IL-7或IL-21不能有效扩增γδ T细胞,但单独使用IL-15可以使γδ T细胞纯度、扩增效率及细胞毒活性均达到与单独使用IL-2相当的水平;IL-2与 IL-15联合使用,可促进γδ T细胞表达CD69,从而显著提高其扩增效率(P<0.05);而IL-2与 IL-21联合使用,可通过促进γδ T细胞颗粒酶A的表达,增强其对Daudi细胞的细胞毒活性(P<0.001);IL-2、IL-15和IL-21联合使用可以显著提高γδ T细胞的细胞毒活性,但是会影响其扩增效率;而仅在效应前短时间添加IL-21,同样可以有效增强γδ T细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性(P<0.05).结论在用固相化TCR γδ抗体加IL-2体外扩增培养γδ T细胞体系中,使用IL-15,而在回输效应前短时间添加IL-21,显著提高γδ T细胞扩增效率及对肿瘤细胞的细胞毒活性,此为目前最优化的γδ T细胞体外扩增培养方案.
γδT细胞、体外扩增、白细胞介素-15、白细胞介素-21
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R392.11
国家自然科学基金81673010;国家自然科学基金青年项目31500725;中国医学科学院基本科研业务项目2016ZX310180-5
2017-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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