小鼠胚胎肝祖细胞的分离和扩增培养

摘要：

目的 从胎龄14.5 d的C57小鼠胚胎肝脏中分离、培养小鼠胚胎肝祖细胞(mHPCs), 并将其诱导分化为胆管细胞.方法 用荧光激活细胞筛选法(FACS)分选DLK1表面抗原阳性的小鼠胚胎肝细胞, 并和小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)Transwell共培养或者单独培养.细胞免疫荧光检测刚分选和共培养4和6 d的DLK1+细胞的甲胎蛋白(AFP)、白蛋白(ALB)及细胞角蛋白19(CK19)抗原的表达.结果 体外共培养时, 大部分DLK1+细胞分裂增殖明显, 呈葡萄状聚集生长.第4天, 部分细胞开始贴壁增殖, 形态开始变成梭形. 结果 显示, 分选的DLK1+细胞表达AFP和少量ALB, 但不表达CK19;在共培养的第4天其开始表达CK19, 和微弱表达ALB;第6 天, 其高表达CK19, 而几乎不表达的ALB. 结论 应用FACS技术成功从E14.5胎肝细胞中分选出DLK1+细胞并鉴定其大部分为mHPCs, 并可在体外与MEFs Transwell共培养的条件下, 诱导培养其分化为胆管细胞.

关键词：肝祖细胞、小鼠胚胎成纤维细胞、胆管细胞、荧光激活细胞筛选法

所属期刊栏目：37

分类号：R322.47;R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金 81470898

在线出版日期：2017-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：648-652