PTEN表达下调促进体外活化大鼠肝星状细胞黏附

摘要：

目的 探讨腺病毒介导的短发夹RNA(shRNA)下调第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物PTEN基因的表达对体外培养的活化肝星状细胞(HSC)黏附的影响及其信号传导机制.方法 体外培养活化大鼠肝星状细胞系HSC-T6,以腺病毒为载体将靶向PTEN的RNA干扰(shRNA)瞬时转染HSC;实验分为3组:1)对照组,在腺病毒转染时以DMEM代替病毒液;2)Ad-GFP组,转染仅表达绿色荧光蛋白(GFP)的空病毒Ad-GFP;3)Ad-shRNA/PTEN组,转染携带靶向PTEN的shRNA并表达GFP的重组腺病毒Ad-shRNA/PTEN.用实时荧光定量PCR法检测HSC的PTEN mRNA表达;Western blot检测HSC的PTEN、黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK[p-FAK(Tyr397)]蛋白表达;甲苯胺蓝染色法及四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定HSC黏附能力.结果 腺病毒感染HSC 48 h,Ad-shRNA/PTEN组PTEN蛋白及mRNA表达明显低于对照组及Ad-GFP组(P<0.05);Ad-shRNA/PTEN组HSC的p-FAK(Tyr397)表达较对照组及Ad-GFP组显著升高(P<0.05);Ad-shRNA/PTEN组HSC黏附细胞数及黏附率较对照组及Ad-GFP组明显增加(P<0.05).结论 PTEN表达下调可通过上调FAK信号传导活性促进体外活化HSC的黏附.

关键词：肝星状细胞、PTEN、RNA干扰、细胞黏附

所属期刊栏目：37

分类号：R575.2(消化系及腹部疾病)

资助基金：河北省自然科学基金H2013209327;中国肝炎防治基金会天晴肝病研究基金CFHPC20132078

在线出版日期：2017-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：364-368