10.3969/j.issn.1001-6325.2017.02.011
人瘦素基因过表达增强大鼠骨髓基质细胞成骨能力
目的:探讨人瘦素(hLEP)基因修饰对大鼠骨髓基质细胞(rBMSCs)成骨能力的影响。方法以转染hLEP腺病毒载体(Ad5-hLEP-EGFP)的rBMSCs为实验组,空载体(Ad5-EGFP)转染的rBMSCs 和未转染的rBMSCs 为对照组。 MTT法检测细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法检测Ⅰ型胶原( Col-Ⅰ)和碱性磷酸酶( ALP) mRNA的表达,茜素红染色检测矿化结节形成能力。同时,将各组rBMSCs与β磷酸三钙(β-TCP)复合后移植于裸鼠皮下培养8周,观察新骨形成情况。结果 Ad5-hLEP-EGFP能有效转染rBMSCs,转染后细胞增殖活性无明显改变,但Col-Ⅰ和ALP mRNA的表达较对照组有明显提高( P<0.05),矿化结节形成能力也更强( P<0.05)。而且, hLEP修饰后的rBMSCs能与β-TCP结合形成组织工程化复合物,并能在裸鼠体内形成更多的类骨样组织。结论 hLEP 修饰的rBMSCs可增强细胞成骨能力,有望应用于骨及牙周组织再生研究。
瘦素、骨髓基质细胞、基因转染、腺病毒、β磷酸三钙
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R781.4(口腔科学)
国家自然科学基金81100761;福建省自然科学基金2012 J05144;温州市科技局医学专项基金Y20140312
2017-03-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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