沉默CHOP基因降低衣霉素诱导的小鼠肝癌Hepa1-6细胞凋亡

摘要：

目的 构建有效针对小鼠C/EBP同源蛋白(CHOP)的shRNA真核表达载体,基因沉默后对Hepa 1-6细胞凋亡的影响.方法 设计合成针对CHOP的shRNA靶序列及无同源性的shRNA序列作为阴性对照,退火后重组入pLKO.1-TRC载体,转化扩增后进行快速双酶切鉴定;慢病毒包装法转染293T细胞获得的病毒上清转染Hepa 1-6细胞,用含嘌呤霉素的培养基连续筛选10获得稳定株,Western blot检测Caspase9和c-PARP蛋白表达,流式细胞术检测细胞周期.结果 各shRNA载体构建成功;与阴性对照组相比,shCHOP组能显著抑制CHOP蛋白的表达(P＜0.05);且CHOP基因沉默后明显降低了衣霉素诱导的细胞凋亡(P＜0.05).结论 CHOP基因沉默能减缓衣霉素诱导内质网应激产生的Hepa 1-6细胞凋亡.

关键词：短发卡RNA、慢病毒载体、CHOP、细胞凋亡、内质网应激

所属期刊栏目：36

分类号：Q25(细胞生理学)

资助基金：国家自然科学基金81270431

在线出版日期：2017-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1646-1651