利用同源序列确定人GIPC2核心启动子和寻找可能的顺式作用元件
目的 利用同源序列确定人GIPC2核心启动子区和寻找可能存在的基因调控区域.方法 1)利用Vista比对不同物种GIPC2基因编码区和非编码区序列,得到GIPC2同源序列;2)分别构建插入人和大鼠GIPC2翻译起始位点ATG上游不同长度截短片段的重组质粒,转染人HEK293T细胞和大鼠PC12细胞;3)根据报告基因荧光强度推断人和大鼠GIPC2的核心启动子区;4)将人GIPC2内含子区同源序列置于核心启动子前面,构建重组质粒,转染HEK293T,HT-29和PC12细胞,检测启动子活性.结果 人GIPC2核心启动子区确定为+32至+190序列区域;人和大鼠GIPC2 ATG上游一段同源序列有抑制GIPC2启动子活性的功能;人和大鼠GIPC2第一个内含子内的同源序列有促进启动子活性的功能.结论 利用同源序列方法确定了人GIPC2基因的核心启动子区,并且找到能抑制和促进GIPC2启动子活性的可能的顺式作用元件.
GIPC2、核心启动子区、同源序列、基因表达调控
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R34(人体生物化学、分子生物学)
2016-08-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
688-693