葡萄糖氧化酶诱导的氧化应激抑制α4β2烟碱型乙酰胆碱受体电流
目的 探究葡萄糖氧化酶(GO)引起的氧化应激对α4β2烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)电流的影响.方法 在HEK293T细胞共转染α4和β2质粒48 h后进行实验.分为对照组(control组)、3.5 kU/L的GO处理组(GO组)、3.5 kU/L的GO与450 kU/L的过氧化氢酶(CAT)共处理组(CAT组).使用DCFH-DA荧光探针以及激光共聚焦显微镜来检测活性氧(ROS)的产生;采用全细胞膜片钳检测α432 nAChR的电流变化,给予1、10和30 μmol/L ACh检测受体功能,给予10 μmol/L ACh检测电流变化.结果 全细胞膜片钳记录到呈ACh剂量依赖性的电流;GO处理HEK293T细胞1h后可显著地增强细胞活性氧的水平(P ＜0.001);对照组电流在10次给药中均保持稳定,GO组的电流在连续10次的ACh给药下逐渐降低(P＜0.01);CAT组反转GO引起的α4β2 nAChR电流下降(P＜0.01).结论 GO引起的氧化应激状态导致α4β2 nAChR电流逐渐下降,α4β2 nAChR电流的下降与ROS的增多密切相关.
活性氧、氧化应激、烟碱型乙酰胆碱受体
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Q424(神经生理学)
国家自然科学基金31271136,31571202;北京市教委科技计划KZ201210025020;北京市属高等学校青年拔尖人才培育计划CIT&TCD201504087
2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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