稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的卵巢癌OVCAR3细胞系的建立与鉴定
目的 建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的卵巢癌OVCAR3细胞系并研究CKS2敲除对卵巢癌OVCAR3细胞增殖的影响.方法 根据siRNA的原理设计2对靶向CKS2的shRNA序列,构建慢病毒表达质粒(pLVTHM/CKS2 shRNA重组质粒);先用pLV-tTR/KRAB-Red空载体制备慢病毒并感染OVCAR3细胞;在此基础上再用pLVTHM/CKS2 shRNA重组质粒制备慢病毒并感染上述OVCAR3细胞;对上述两次慢病毒感染的OVCAR3细胞,用强力霉素(DOX)处理72 h后,用real time PCR及Western blot检测CKS2 mRNA及蛋白的表达;用MTT法检测细胞增殖.结果 构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达质粒,包装出慢病毒并感染OVCAR3细胞;建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的OVCAR3细胞系,通过DOX诱导,可明显抑制该细胞系中CKS2在mRNA及蛋白水平的表达(P＜0.05,P＜0.01);CKS2敲除可明显抑制OVCAR3细胞的增殖.结论 建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的OVCAR3细胞系,DOX诱导的CKS2敲除可明显抑制OVCAR3细胞增殖.
CKS2、可诱导型shRNA、卵巢癌
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R737.9(肿瘤学)
国家自然科学基金81550029,30800410;三峡大学人才启动基金KJ2014B064;湖北省自然科学基金2015CFB198;大学生科技创新重点项目2015YCX004;三峡大学教学研究重点项目J2015023
2016-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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