ESRP1剪接变异体的克隆及其对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响
目的 克隆ESRP1剪接变异体并构建其慢病毒表达载体,研究其对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖的影响.方法 以OVCAR3细胞的cDNA为模板,PCR扩增ESRP1剪接变异体,将其连接到带有Myc标签的pCMV-Myc真核表达载体;再以该真核表达载体为模板,将含有Myc标签的ESRP1剪接变异体克隆到慢病毒表达载体pLV-tTR/KRAB-Red上,从而构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体慢病毒表达载体;用该慢病毒表达载体转染293T细胞,包装慢病毒;用该慢病毒感染MDA-MB-231细胞,用MTT法检测该细胞增殖,用Western blot检测该细胞中PARP蛋白的表达.结果 成功构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体慢病毒表达载体,并包装出慢病毒;用该慢病毒感染MDA-MB-231细胞后,与空载体对照组比较,ESRP1过表达能明显抑制MDA-MB-231细胞增殖(P＜0.05);ESRP1过表达能诱导PARP蛋白的剪切.结论 成功构建带有Myc标签的ESRP1剪接变异体的慢病毒表达载体;ESRP1过表达能抑制MDA-MB-231细胞增殖,这可能与细胞死亡有关.
ESRP1、乳腺癌、细胞增殖、选择性剪接
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R737.9(肿瘤学)
国家自然科学基金81550029,30800410;三峡大学人才启动基金KJ2014B064;湖北省自然科学基金2015CFB198;大学生科技创新项目2015YCX062;三峡大学教学研究重点项目J2015023;肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室三峡大学开放基金课题2015KZL02
2016-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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