CKS2shRNA慢病毒表达载体的构建及其抑制卵巢癌A2780细胞增殖
目的 构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,并探讨CKS2敲除对卵巢癌细胞A2780增殖的影响.方法 根据siRNA原理设计两对靶向CKS2的shRNA序列(shRNA1、shRNA2)及阴性对照NC shRNA,并克隆到慢病毒表达载体PL-KO.1/puro中;将上述质粒转染到293T细胞并包装出慢病毒,用慢病毒感染卵巢癌细胞A2780,实时定量PCR及Westernblot检测CKS2表达;MTT法检测A2780细胞增殖;Western blot检测PARP-1的剪切;流式细胞术检测凋亡.结果 成功构建CKS2 shRNA慢病毒表达载体能明显降低A2780细胞中CKS2 mRNA及蛋白表达(P＜0.05);能显著抑制A2780靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,并包装出慢病毒;感染A2780细胞后,细胞增殖受抑(P＜0.05);能诱导PARP-1蛋白的剪切及凋亡(P＜0.05).结论 成功构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达载体,能显著抑制A2780细胞增殖.
CKS2、卵巢癌、细胞增殖、选择性剪接
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R737.9(肿瘤学)
国家自然科学基金81550029,30800410;三峡大学人才启动基金KJ2014B064;湖北省自然科学基金2015CFB198;大学生科技创新重点项目2015YCX004;三峡大学教学研究重点项目J2015023;肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室三峡大学开放基金课题2015KZL02
2016-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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