血管生成素及其突变体与核糖核酸酶抑制因子蛋白的相互作用

摘要：

目的 研究血管生成素(ANG)突变体与核糖核酸酶抑制因子(RI)的相互作用.方法 构建pCMV-3×flag-ANGH13R和pCMV-3×flag-ANGH114R突变体质粒;用免疫荧光标记结合共聚焦显微镜技术来确立RI与ANG突变体蛋白在BIU-87细胞内的定位;用GST融合蛋白沉降技术检测RI与ANG突变体蛋白在细胞外的相互作用;用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测两蛋白在人膀胱癌BIU-87细胞内的相互作用.结果 pCMV-3×flag-ANGH13R和pCMV-3×flag-ANGH114R突变体质粒构建成功;RI和ANG突变体蛋白存在共定位现象;GST-RI融合蛋白诱导表达正确,RI和ANG突变体蛋白在原核反应体系中存在相互作用;RI与ANG突变体蛋白在真核细胞内存在相互作用.结论 RI和ANG突变体蛋白在原核反应体系和真核细胞中都存在相互作用,并且两突变型与RI相互作用存在一定的差异.

关键词：血管生成素突变体、核糖核酸酶抑制因子、BIU-87细胞

所属期刊栏目：35

分类号：R34;R394-33;R394.3(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金81372203, 81172424

在线出版日期：2015-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：313-317