上调miR-200 a的表达减弱TGF-β1刺激的大鼠胰腺星状细胞活化和胶原合成
目的:探讨miR-200a对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的大鼠胰腺星状细胞(PSCs)活化和胶原蛋白合成的影响。方法用组织块法培养分离PSCs,免疫荧光染色检测结蛋白( desmin)、神经胶质原纤维酸性蛋白( GFAP)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达鉴定PSCs;取新鲜培养的第2代PSCs,设空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+miR-NC组、TGF-β1+miR-200 a mimic组,Western blot法和细胞免疫荧光染色法检测α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白( col-lagen Ⅰ)的表达,荧光定量PCR检测α-SMA、collagen Ⅰ mRNA及miR-200 a的表达。结果 TGF-β1可刺激大鼠PSCs活化及促进胶原蛋白的合成( P<0.05),且呈时间依赖性;转染miR-200 a mimic后,在相同浓度的TGF-β1刺激下,α-SMA和collagen Ⅰ的蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论上调miR-200a的表达,可减弱TGF-β1对大鼠PSCs活化和胶原蛋白合成的刺激作用,其可能的机制是抑制TGF-β1的生物学作用。
TGF-β1、PSCs、miR-200a、纤维化
R576(消化系及腹部疾病)
江苏省自然科学基金BK2013247;镇江市“169四期工程”科研项目镇人才办201319号
2015-12-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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