重组的脂联素调节肝细胞系L02基质金属蛋白酶-9表达及活性
目的 观察重组脂联素对肝细胞系L02基质金属蛋白酶-9表达及活性的影响,探讨脂联素在肝纤维化中的作用.方法 细胞分未转染对照组、转染空载体组、整合了adi-pEGFP-C1的L02细胞3组.体外扩增脂联素adiponectin mRNA全长,通过双酶切、插入及连接等基因克隆方法构建真核表达载体adi-pEGFP-C1.然后通过基因转染方法,将adi-pEGFP-C1转染到肝细胞系L02细胞中.通过G418压力筛选出adi-pEGFP-C1/L02稳定细胞系,用基因、蛋白以及蛋白酶谱等技术检测基质金属蛋白酶MMP-9的基因水平、蛋白水平以及酶的活性水平.结果 adi-pEGFP-C1构建成功,并成功筛选到L02稳定细胞系adi-pEGFP-C1/L02,与空白对照组相比,MMP-9mRNA表达水平上调(P<0.01),MMP-9蛋白水平和活性均上调(P<0.05).结论 脂联素通过调节MMP-9的表达及活性可能影响肝纤维化进程.
脂联素、肝纤维化、肝细胞L02、基质金属蛋白酶-9
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R365(病理学)
国家自然科学基金81302848;浙江省教育厅课题Y201226089
2014-12-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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