小RNA干扰PCBP2在神经胶质瘤细胞中对P53相关基因的调节和对细胞增殖的影响
目的 探索多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)表达下调对相关基因和胶质瘤细胞增殖的影响.方法 3株神经胶质瘤细胞系(T98G、U87MG和U251)各分为2组,分别转入特异性靶向PCBP2基因的小干扰RNA (siRNA)和对照siRNA,用Western blot法检测siRNA对PCBP2蛋白的抑制效果及对P53蛋白和它的两个靶基因PUMA和BAX的表达影响,同时检测P53共调节因子FHL2和同家族成员FHL1表达变化.用生物素pull-down分析PCBP2是否和FHL家族成员mRNA结合.用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖能力,Hoechst染色观察细胞凋亡率.结果 PCBP2 siRNA转染这3株细胞后使PCBP2蛋白表达水平明显下调(P<0.05);增加P53及它的靶基因PUMA和BAX的蛋白表达(P<0.05);抑制FHL2蛋白(P<0.05),但并不结合其mRNA的3'非编码区(3'UTR);BrdU阳性细胞减少(P<0.05);Hoechst染色阳性细胞增多(P<0.05).结论 抑制PCBP2表达可以增强胶质瘤细胞中P53通路活性,并减弱细胞增殖能力,诱导细胞凋亡.
RNA干扰、多聚胞嘧啶结合蛋白2、P53、细胞增殖、细胞凋亡
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Q291
国家自然科学基金31301152
2014-07-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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