CDR3δ2基因修饰γδT细胞的构建及其功能鉴定

摘要：

目的 将全长p链mRNA和肿瘤反应性CDR3移植的δ2链mRNA共转染到抗CD3抗体刺激的PBMC,制备CDR3δ2基冈修饰型γδ T淋巴细胞,研究其抗肿瘤作用.方法 通过PCR扩增含有肿瘤反应性特异CDR3δ2序列(OT3和OT10)的TCR δ2链及γ9链,构建重组质粒pGEM4Z/δ2(OT3)/A64、pGEM4Z/ δ2(OT10)/ A64和pGEM4Z/γ9/ A64;以线性化的重组质粒作为模板,体外合成δ2(OT3)、δ2(OT10)和γ9 mRNA;将δ2(OT3)mRNA和δ2(OT10) mRNA分别与 γ9 mRNA共电转染入抗CD3抗体刺激的正常人PBMC;经流式细胞术检测和分选pδ2(OT3)T细胞和γ%2(T10)T细胞.ELISA及MTT法分别检测上述转染细胞的抗肿瘤作用.结果 CDR3δ2基因修饰的TCRγδ细胞pδ2(OT3)T细胞和γ9δ2 (T10)T细胞能够分泌较高的IFN-γ及TNF-α(P＜0.05),对多种肿瘤细胞具有显著的细胞毒作用(P＜0.05).结论 基因修饰型pδ2 T细胞能够明显增强对肿瘤的杀伤活性,为肿瘤过继免疫细胞的制备提供了新的策略.

关键词：T细胞、CDR3δ2、γδTCR、过继免疫治疗、OT3、OT10

所属期刊栏目：34

分类号：R392.12

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2012AA020901

在线出版日期：2014-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：746-752