Ezrin介导中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的人气道上皮细胞株分泌黏蛋白增加
目的 探讨膜连接蛋白Ezrin在中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导气道黏液高分泌的作用及相关调节机制.方法 以中性粒细胞弹性蛋白酶刺激培养的人气道上皮HBE16细胞,ELISA法、real-time PCR法测定黏蛋白(MUC)5AC的蛋白及mRNA水平.免疫荧光法检测Ezrin蛋白含量.结果 NE刺激30 min后MUC5AC mRNA表达增强,细胞中及培养上清中黏蛋白MUC5AC的含量均显著高于对照组(P＜0.01);转染Ezrin永久磷酸化载体pEGFP-N1-Ezrin-T567D的细胞经NE刺激后,胞质内磷酸化Ezrin表达明显增强,且胞膜分布增多.同时,细胞培养上清液中的MUC5AC蛋白含量亦显著高于单纯NE组(P＜0.01).遏制Eznn磷酸化pEGFP-N1-Ezrin-T567A载体转染组在NE刺激后,Ezrin蛋白与pEGFP-N 1-Ezrin-T567D组相比有明显减少,且未出现向胞膜聚集的趋势,同时分泌至培养上清的MUC5AC蛋白也有明显减少(P＜0.01),同时伴随胞质内MUC5AC蛋白有所增加(P＜0.05).结论 Ezrin蛋白参与了NE诱导的MUC5AC蛋白分泌,是气道上皮细胞MUC5AC分泌的重要调控分子.
黏蛋白类、分泌、白细胞弹性蛋白酶、Ezrin
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R363.1(病理学)
国家自然科学基金81100003,31171346;重庆市自然科学基金cstc2011jjA10046;教育部博士点基金20115503120006
2014-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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