敲减水通道蛋白1对小鼠雪旺细胞形态及水转运的影响
目的 探讨水通道蛋白1(AQP1)基因表达和雪旺细胞肿胀之间的关系.方法 细胞免疫荧光双标法验证小鼠面神经来源的原代雪旺细胞AQP1表达;应用慢病毒RNA干扰技术下调雪旺细胞AQP1表达;AQP1-shRNA感染雪旺细胞后,与CTRL组(scr-shRNA)比较,每天在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,连续6d;细胞容积测定量化AQP1-shRNA细胞与CTRL (scr-shRNA)细胞水含量变化;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测AQP1-shRNA对雪旺细胞凋亡的影响.结果 小鼠面神经来源的原代雪旺细胞表达AQP1;构建的小鼠AQP1-shRNA慢病毒载体感染雪旺细胞后,能在mRNA和蛋白水平明显抑制AQP1表达(P<0.05);AQP1-shRNA能使雪旺细胞形态皱缩,细胞水含量明显降低(P<0.01);AQP1-shRNA细胞较CTRL组细胞增殖活力低(P<0.05),但不会引起雪旺细胞明显的凋亡.结论 AQP1是控制雪旺细胞快速水转运的主要因素,抑制AQP1表达可能提供一种临床治疗面神经水肿的新方法.
水通道蛋白、RNA干扰、慢病毒、面瘫、基因治疗
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R363(病理学)
国家自然科学基金31271264
2014-04-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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