在SW480细胞中沉默survivin基因抑制细胞增殖及hTERT表达

摘要：

目的 观察生存素(survivin)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制.方法 构建携带survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-survivin,转染结肠癌SW480细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞增殖周期;荧光定量PCR和Western blot检测survivin、h TERT和Sp1的mRNA和蛋白表达,TRAP-ELISE法检测端粒酶活性.构建靶向Sp1基因的RNA干扰载体转染SW480细胞,检测hTERT基因mRNA和蛋白水平及端粒酶活性.结果 Survivin基因干扰后,SW480细胞增殖受到明显抑制,增殖抑制率为34.44％ (P ＜0.05),G0/G1期细胞增加,S期和G2/M期细胞减少(P＜0.01).hTERT和Sp1基因的mRNA和蛋白表达水平显著降低,端粒酶活性降低(P＜0.01).Sp1基因干扰后,hTERT基因的mRNA和蛋白表达水平及端粒酶活性下降(P＜0.01).结论 靶向沉默survivin基因对SW480细胞增殖有明显的抑制作用;同时下调hTERT基因表达,其机制可能与Sp1基因表达下调有关.

关键词：RNA干扰、survivin、hTERT、Sp1

所属期刊栏目：33

分类号：R318.14(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金30901779;山东省自然科学基金ZR2010HM065,ZR2009CL047;山东省高等学校科技计划项目J10LC20;潍坊市科技局资助项目20121227

在线出版日期：2014-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1528-1532