NH4Cl对人肝细胞系LO2氨转运相关蛋白RHCG和AQP8表达的影响
目的 检验氯化铵是否能够特异性地刺激肝细胞,使其内部与氨离子转运有关的RHCG和AQP8基因表达发生变化.方法 培养人正常肝脏细胞(LO2)、甲状腺癌细胞(TPC-1)、卵巢癌细胞(SKOVR-3)和食管癌细胞(9706),NH4Cl(2.5、5、10、20、40和50 mmol/L)对4种细胞作用24 h后,MTT法检测细胞的增殖；荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测LO2细胞经5、10和20 mmol/L的NH4Cl处理不同时间(6、12和24 h)后,AQP8 和RHCG基因及蛋白的表达；10 mmol/L的NH4Cl处理TPC-1、SKOVR-3和9706细胞不同时间(6、12和24 h)后,AQP8和RHCG基因及蛋白的表达.结果 随着NH4Cl浓度的增加,氨对肝细胞LO2的增殖抑制率逐渐增加且明显大于其他细胞系；10 mmol/L NH4Cl作用于LO2细胞6h时,RHCG基因表达量明显下调(P＜0.05),而AQP8基因的表达量在作用12 h后较对照组明显增加(P＜0.05)；10 mmol/L NH4Cl作用于L02细胞24 h时,AQP8蛋白表达量较对照组显著增加(P＜0.0.5),而RHCG无变化；相同浓度NH4C1作用其他细胞系相同时间时,AQP8和RHCG的基因和蛋白水平均未见显著性变化.结论 在氨升高的环境中,人肝细胞通过调节氨转运相关蛋白AQP8和RHCG的量来维持对氨摄取的平衡,减少氨对肝细胞的特异性损伤,在其他细胞系中无此现象.
氯化铵、氨转运体、RHCG、AQP8
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R-332(医学研究方法)
2013-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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